4-nítrófenýl beta-D-galaktópýranósíð CAS: 200422-18-0

Áhrif: ONPG er hvarfefni sem er sérstaklega notað til að greina nærveru og virkni ensímsins β-galaktósídasa. Þegar β-galaktósídasi ensímið er til staðar og virkt, klýfur það ONPG í tvær afurðir: o-nítrófenól og galaktósaafleiðu. Losun o-nítrófenóls veldur gulum litabreytingum, sem hægt er að mæla með litrófsmæli.

Notkun: ONPG hefur marga notkunarmöguleika í rannsóknum á sameindalíffræði og lífefnafræði:

Ákvörðun á virkni β-galaktósídasa: ONPG er almennt notað til að mæla og magngreina virkni β-galaktósídasa ensímsins. Hægt er að mæla hraða o-nítrófenólsmyndunar, sem er í beinu hlutfalli við ensímvirknina, með litrófsmælingu.

Genatjáning og stjórnun: ONPG er oft notað í tilraunum sem tengjast rannsóknum á genatjáningu og stjórnun. Það er oft notað í samrunaprófum á próteinum, eins og algengu lacZ samrunakerfinu, til að rannsaka tjáningu gena undir stjórn ákveðinna hvata. Beta-galaktósídasa virknin sem mæld er með ONPG veitir innsýn í stig genatjáningar.

Skimun fyrir virkni β-galaktósídasa: ONPG er hægt að nota sem litrófsmælingaraðferð í erfðatækni til að bera kennsl á tilvist og virkni LacZ gensins, sem kóðar fyrir β-galaktósídasa. Þessi skimunaraðferð hjálpar til við að bera kennsl á klóna sem innihalda genið sem um ræðir.

Rannsóknir á hvarfhraða ensíma: ONPG er einnig gagnlegt við rannsóknir á hvarfhraða β-galaktósídasa ensíma. Með því að mæla hraða ensím-hvarfefnisviðbragða við mismunandi hvarfefnisstyrk er hægt að ákvarða hvarffræðilegar breytur eins og Michaelis-Menten fasta (Km) og hámarks hvarfhraða (Vmax).