Það eru margar ósungnar hetjur í kringum okkur, sem virðast vera venjulegar, en í raun leggja þær í hljóði mikið til okkar.Próteinasi K er „ósungna hetjan“ í sameindagreiningariðnaðinum, þó miðað við „stóra og öfluga“ í greininni er próteinasi K svo lágkúrulegur að við höfum lengi yfirsést mikilvægi þess.Þegar nýja krúnufaraldurinn braust út hefur eftirspurnin eftir próteinasa K aukist mikið og framboðið hér heima og erlendis er langt á eftir neyslunni og allir áttuðu sig allt í einu á því að próteinasa K er svo mikilvægt.
Hver er notkun próteinasa K?
Próteinasi K er serínpróteasi með próteinlýsandi ensímvirkni og getur viðhaldið virkni í fjölmörgum umhverfi (pH (4-12,5), saltstuðpúði, hátt hitastig 70°C o.s.frv.).Að auki er virkni próteinasa K ekki hamlað af SDS, þvagefni, EDTA, gúanidínhýdróklóríði, gúanidínísóþíósýanati o.s.frv., og ákveðið magn af þvottaefni getur einnig aukið virkni próteinasa K. Í læknismeðferð (sótthreinsun veira og örvera) ), matur (kjötmýnun), leður (mýking hár), víngerð (alkóhólhreinsun), amínósýruundirbúningur (niðurbrotnar fjaðrir), kjarnsýruútdráttur, in situ blending o.s.frv., próteinasi K Það eru til forrit.Algengasta forritið er kjarnsýruútdráttur.
Próteinasi K getur ensímgreint alls kyns prótein í sýninu, þar á meðal þessi histón sem eru þétt bundin við kjarnsýrur, þannig að kjarnsýrurnar geta losnað úr sýninu og losað út í útdráttinn, sem auðveldar næsta skref útdráttar og hreinsunar.Við greiningu á veirukjarnsýru er próteinasi K einn af mikilvægum þáttum í vírussýnatökulausninni.Próteinasi K getur sprungið og óvirkt hjúpprótein veirunnar, sem er öruggara á flutnings- og greiningarstigi;að auki getur próteinasi K einnig brotið niður RNase kemur í veg fyrir niðurbrot veiru-RNA og auðveldar greiningu kjarnsýra.
Frægð próteinasa K á einni nóttu
Hvort sem er á sviði vísindarannsókna eða á sviði IVD er kjarnsýruútdráttur grunntilraunin, svo próteinasi K hefur alltaf verið mjög mikilvæg tilvera.Hins vegar, í fortíðinni, var próteinasi K mun minna þekktur en hlutverk þess.Stór hluti af þessu var vegna þess að framboð og eftirspurnarsamband próteinasa K var mjög stöðugt.Fáir myndu halda að framboð á próteinasa K væri vandamál.
Þegar nýja krúnufaraldurinn braust út hefur eftirspurn eftir kjarnsýruprófum aukist.Í lok júní 2020 hefur Kína lokið næstum 90 milljónum nýrra kórónuprófa og þessi tala er enn skelfilegri á heimsvísu.Í kjarnsýruútdráttartilraunum er vinnustyrkur próteinasa K um 50-200 μg/mL.Almennt þarf um 100 μg af próteinasa K til að draga sýni af kjarnsýru.Í raunverulegri notkun, til að auka skilvirkni kjarnsýruútdráttar, verður próteinasi K oft notað í auknu magni.Kjarnsýrugreining á nýju kransæðavírnum hefur leitt til mikillar eftirspurnar eftir próteinasa K.Upprunalegt framboð og eftirspurnarjafnvægi próteinasa K var fljótt rofið og próteinasi K varð mikilvægt faraldursvarnaefni á einni nóttu.
Erfiðleikar við framleiðslu próteinasa K
Þótt með þróun faraldursins hafi mikilvægt gildi próteinasa K verið metið af fólki, þá er það vandræðalegt að vegna óhóflegrar lágkúru próteinasa K hafa fá innlend fyrirtæki tekið þátt í framleiðslu próteinasa K. Þegar fólk vilja koma á próteinasa K framleiðslu Í framleiðsluferlinu kom í ljós að próteinasi K er einstaklega sérstakt prótein.Það er gríðarlega krefjandi að auka framleiðslugetu próteinasa K á stuttum tíma.
Stórfelld framleiðsla á próteinasa K stendur frammi fyrir eftirfarandi erfiðleikum
1. Lítil tjáning
Próteinasi K getur brotið niður flest prótein ósértækt og valdið alvarlegum eiturverkunum á tjáningarhýsilfrumu.Þess vegna er tjáningarstig próteinasa K yfirleitt mjög lágt.Skimun á tjáningarkerfum og stofnum sem mjög tjá próteinasa K krefst yfirleitt lengri hringrásar.
2. Leifar af litarefnum og kjarnsýrum
Stórfelld gerjun kynnir mikið magn af litarefni og hýsilkjarnsýruleifum.Það er erfitt að fjarlægja þessi óhreinindi með einföldu hreinsunarferli og flókin hreinsun eykur kostnaðinn og dregur úr endurheimtarhraða.
3. Óstöðugleiki
Próteinasi K er ekki nógu stöðugt, það getur ensímgreint sjálft sig og erfitt að geyma það stöðugt við 37°C í langan tíma án hlífðarefnis.
4. Auðvelt að fella út
Þegar frostþurrkað duft af próteinasa K er útbúið, til að tryggja að fast efni próteinasa K í frostþurrkaða duftinu sé mikið, er nauðsynlegt að bæta við frostþurrkuðu varnarefni í miklum styrk, en þegar styrkur próteinasa K nær 20mg/mL og þar yfir, það er auðvelt. Samsöfnunin myndar botnfall, sem veldur miklum erfiðleikum við frostþurrkun próteinasa K með hátt fast efni.
5. Mikil fjárfesting
Próteinasi K hefur sterka próteasavirkni og getur vatnsrofið aðra próteasa á rannsóknarstofunni.Þess vegna þarf próteinasa K sérhæfð framleiðslusvæði, búnað og starfsfólk til rannsókna og þróunar og framleiðslu.
XD BIOCHEM's próteinasa K lausn
XD BIOCHEM hefur þroskaðan próteintjáningar- og hreinsunarvettvang og hefur mikla reynslu í tjáningu og hreinsun raðbrigða próteina og hagræðingu framleiðsluferla.Með hraðri myndun rannsóknar- og þróunarteymis hefur stórfellt framleiðsluferli próteinasa K verið sigrast á.Mánaðarleg framleiðsla af frostþurrkuðu dufti er meira en 30 kg.Varan hefur stöðugan árangur, mikla ensímsértæka virkni og engar hýsilsýtókróm- og kjarnsýruleifar.Velkomið að hafa samband við XD BIOCHEM Fáðu prufupakka (E-mail:sales@xdbiochem.comSími: +86 513 81163739).
Tæknilausnir XD BIOCHEM eru ma
Með því að nota fjölafrita plasmíðsamþættingu eru hátjáningarstofnar með tjáningarstig 8g/L valdir, sem sigrar vandamálið við lágt tjáningarstig próteinasa K.
Með því að koma á fót fjölþrepa hreinsunarferli tókst að fjarlægja hýsilsýtókróm og kjarnsýruleifar próteinasa K undir staðlaða gildinu.
Með skimun með mikilli afköstum á hlífðarbuffasamsetningum var valinn jafnalausn sem getur geymt próteinasa K á stöðugan hátt við 37°C.
Skimunarbuffar vinna bug á því vandamáli að auðvelt er að safna saman próteinasa K og fella út í háum styrk og leggja grunninn að frostþurrkun á háu föstu innihaldi próteinasa K.
XD BIOCHEM próteinasa K sýni
XD BIOCHEM próteinasa K stöðugleikapróf: engin marktæk breyting verður á virkni eftir 80 d við stofuhita
XD BIOCHEM próteinasa K stöðugleikapróf: engin marktæk breyting verður á virkni eftir 80 d við stofuhita.
Samanburður á kjarnsýruútdráttaráhrifum XD BIOCHEM próteinasa K og samkeppnisvara.Í ferlinu við kjarnsýruútdrátt eru XD BIOCHEM og samkeppnispróteinasa K notuð í sömu röð.Útdráttarvirkni XD BIOCHEM próteinasa K er hærri og Ct gildi markgensins er lægra.
Birtingartími: 31. desember 2021